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FOXP3,小鼠叉頭型基因P3酶聯(lián)免疫試劑盒范圍

FOXP3,小鼠叉頭型基因P3酶聯(lián)免疫試劑盒范圍

簡(jiǎn)要描述:FOXP3,小鼠叉頭型基因P3酶聯(lián)免疫試劑盒范圍用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中小鼠叉頭型基因P3(FOXP3)的含量。

產(chǎn)品型號(hào):

所屬分類:小鼠酶聯(lián)免疫試劑盒

更新時(shí)間:2022-08-29

詳細(xì)說明:

FOXP3,小鼠叉頭型基因P3酶聯(lián)免疫試劑盒范圍

l 本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中小鼠叉頭型基因P3(FOXP3)的含量。

l 有效期:6個(gè)月

l 保存條件:2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷

 

實(shí)驗(yàn)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被小鼠叉頭型基因P3(FOXP3)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠叉頭型基因P3(FOXP3)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。

FOXP3,小鼠叉頭型基因P3酶聯(lián)免疫試劑盒范圍性能

1. 靈敏度:zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。處

3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

操作步驟

實(shí)驗(yàn)開始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。

用于檢測(cè)未知抗體的間接法:

用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。

   ↓

加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)

   ↓

于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,   37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。

   ↓

加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。

     ↓

終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

     ↓

結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。

組成

48孔配置 96孔配置 保存

說明書 1份 1份

封板膜 2片(48) 2片(96)

密封袋 1個(gè) 1個(gè)

酶標(biāo)包被板 1×48 1×96 2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品:13.5U/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存

酶標(biāo)試劑 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存

樣品稀釋液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存

顯色劑A液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存

顯色劑B液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存

終止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存

20倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 30ml×1瓶 2-8℃保存

樣品收集、處理

1、 血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、 細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。



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