人抗凝血酶Ⅲ抗體（AT-Ⅲ）酶聯免疫試劑盒說明書
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中人抗凝血酶Ⅲ抗體（AT-Ⅲ）的含量。
l 有效期：6個月
l 保存條件：2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷
實驗原理
試劑盒采用間接法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被人抗凝血酶Ⅲ抗體（AT-Ⅲ）捕獲抗原的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人抗凝血酶Ⅲ抗體（AT-Ⅲ）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
人抗凝血酶Ⅲ抗體（AT-Ⅲ）酶聯免疫試劑盒說明書操作步驟：
大部分ELISA 檢測均以血清為標本。血清標本可按常規方法采集，應注意避免溶血，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質，以HRP 為標記的ELISA 測定中，溶血標本可能會增加非特異性顯色。血清標本宜在新鮮時檢測如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP，也會產生假陽性反應。一般說來，在5 天內測定的血清標本可放置于4℃，標本在冰箱中保存時間過長導致血清IgG 聚合，使間接法的試劑本底加深。超過一周測定的需－20℃保存。凍結血清融解后，蛋白質局部濃縮，分布不均，應充分混勻并避免產生氣泡。混濁或有沉淀的血清標本應先離心或過濾，澄清后再檢測。反復凍融會使抗體效價跌落，所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應注意無菌操作，也可加入適當防腐劑。
抗凝不*的標本因纖維蛋白原的干擾而造成假陽性，建議盡量不用抗凝血尤其是肝素抗凝劑。
1.血清標本如是以無菌操作分離，則可以在2～8℃下保存一周，如為有菌操作，則建議冰凍保存。樣本的長時間保存，應在-70℃以下。
2.在使用微量加樣器時，吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭，即使吸取標準品溶液。
3.吸取液體時速度不易太快，以免產生氣泡，吸取的量不夠準確。
4.樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染，一則細菌的生長，其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產生分解作用；二則一些細菌的內源性酶，如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作標記的測定方法產生非特異性干擾。1．5 吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸，減少誤差。
5.液體全部加入酶標孔后，將酶標板放在桌子上平行輕輕搖晃30s，使液體充分混合均勻，也使其得到充分的反應。
6.孵育時要使蓋板膜封好酶標板，防止水分蒸發，以防曲線不成線性。
7.實驗前30min將試劑盒中的所有試劑從冰箱取出，使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同，酶標板只要取出所需量。
8.由于底物顯色劑對光及其敏感，因此要避光保存。
要注意避免出現嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團，其有類似過氧化物的活性，因此，在以HRP為標記酶的ELISA測定中，如血清標本中血紅蛋白濃度較高，則其就很容易在溫育過程中吸附于固相，從而與后面加入的HRP底物反應顯色
9.手工洗板時每次加入洗滌液后。應靜置15～30s，不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中，防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。
10.檢測吸光度前應將酶標儀打開，將其預熱30min以上。
11.底物為TMB，避免與皮膚相接觸。終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性，應盡量避免接觸皮膚。
12.孵育的時間應該嚴格按照試劑盒說明書上的時間為準。
13.要盡量做雙孔實驗，這樣才既能保證數據的準確性，又能反映出試劑盒的精密度。
14.冰凍保存的血清標本須注意避免因停電等造成的反復凍融。標本的反復凍融所產生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子產生破壞作用，從而引起假陰性結果。此外，凍融標本的混勻亦應注意，不要進行劇烈振蕩，反復顛倒混勻即可。
15.對樣本的結果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。
16.沒有去離子水或雙蒸水時，可以使用娃哈哈純凈水配制溶液，切勿使用自來水。
17.標本在保存中如出現細菌污染所致的混濁或絮狀物時，應離心沉淀后取上清檢測。
代測相關信息
一、代測范圍
1、本公司公布的試劑盒，可以提供代測服務。
2、本公司上尚未列出的試劑盒，可以代為研發和測定，費用等相關信息咨詢。
二、公司責任
1、對于客戶提供的樣品和要測定的指標，及時提供規范的檢測報告，確保數據真實可靠。未經客戶允許，不得相關信息透露給第三方。
2、對于公司上列出的試劑盒測定指標，我們將在收到樣品之日起13個工作日內提供規范的檢測報告；反之，提供檢測報告的時間由雙方協商決定。
3、本公司的檢測報告僅對收到的樣品負責。為了確保測定結果有效，請客戶在送檢前與本公司客服人員溝通，并且按照要求做好樣品的數量、標簽和寄送等相關事宜。
4、客戶如果對測定結果不滿意，務必在收到檢測報告之日起起5個工作日內與本公司客服人員，商定解決辦法。
5、在收到客戶檢測費起5個工作日內快遞寄送加蓋公章的紙質檢測報告和發票。
三、客戶責任
1、提供樣品的性質（物種和組織等）和處理狀況（有無特殊的化學處理等），確保樣品數量和標簽無誤，以符合要求的方式進行包裝和寄送（注意加足夠的冰袋冷藏，特別嬌貴的樣品請用干冰）。
2、及時付款。一般在寄送樣品時付費用的70%，收到電子版檢測報告，確認無誤后付剩下的30%。如有特殊情況需雙方協商決定。
3、以上單個樣品測定價格包括預測費用、試劑費用、人工費用和數據處理費用以及蛋白質含量測定費用。由于統計處理需要，一般處理每個樣品應該至少測定三次（強烈建議）。如果樣品中已經包括三次或三次以上重復，或者用戶不需要重復測定，請用戶聲明。如果測定樣品數量很多，可以在測定的總費用上進行適當的減免。 四、代測的優勢
1、將要測定的樣品都是有研發該試劑盒的專家全權負責的，因此可以確保測定結果的準確性。
2、節省客戶的寶貴時間和精力。
3、交給我們代測，您可以不必為操作經驗的不成熟和儀器的缺乏而苦惱。
五、附加免費服務
1、根據客戶研究目的，免費提供專業的檢測意見和建議。
2、免費提供樣品蛋白質含量測定。
3、免費提供測定結果分析，包括顯著性差異、指標變化的生理生化意義和相關指標變化之間的關系等。
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我司是一家專業從事“產品研發生產、市場銷售、技術服務”為一體的生物技術公司，公司生產的產品質量有保證，含量高，能夠給實驗帶來準確的結果。同時試劑隨貨附帶質檢報告和圖譜，能為用戶更好的解決各種疑難問題。如有需要可我司銷售人員，我們將竭誠為您服務。
